

文题释义:
脱细胞:是将细胞去除而保留细胞外基质的方法。在细胞外基质分泌较多之后,用PBS配制5%曲拉通X-100、20mmol/L氨水洗涤液,预热至50℃,过滤后将洗涤液加至培养板或培养瓶,37℃条件下反应3min,PBS清洗3遍,即获得细胞外基质。脱细胞处理后获得的细胞外基质可继续用于细胞培养。
背景:已有研究表明细胞外基质可以促进细胞增殖,降低细胞内活性氧水平,但细胞外基质是否能够增强脐带干细胞的抗氧化能力以提高其在再生医学和组织工程中的应用效果,相关研究较少。
目的:探讨细胞外基质对脐带干细胞增殖、抗氧化以及成骨分化潜能的影响。
方法:将脐带干细胞分4组:①聚苯乙烯组:用普通聚苯乙烯培养板培养脐带干细胞,无其他特殊处理;②细胞外基质组:用细胞外基质培养脐带干细胞,无其他特殊处理;③聚苯乙烯+过氧化氢组:用聚苯乙烯板培养脐带干细胞,并用200μmol/L过氧化氢预处理细胞2h;④细胞外基质+过氧化氢组:用细胞外基质培养脐带干细胞,并用200μmol/L过氧化氢预处理细胞2h。过氧化氢预处理2h结束后采用CCK-8法检测脐带干细胞的增殖能力;过氧化氢预处理2h结束后继续培养72h,流式细胞实验和qRT-PCR实验检测脐带干细胞的抗氧化能力;过氧化氢预处理2h结束后成骨诱导分化14d,采用茜素红染色和qRT-PCR实验检测脐带干细胞的成骨能力。
结果与结论:①细胞外基质组和细胞外基质+过氧化氢组的吸光度值分别高于聚苯乙烯组和聚苯乙烯+过氧化氢组;②聚苯乙烯+过氧化氢组和聚苯乙烯组活性氧水平分别高于细胞外基质组和细胞外基质+过氧化氢组();抗氧化酶相关基因SOD2和CAT的表达水平在细胞外基质组和细胞外基质+过氧化氢组分别较聚苯乙烯组和聚苯乙烯+过氧化氢组明显上调();③细胞外基质组成骨相关基因COL1A1、RUNX2、OCN、OSTERIX表达量最高,细胞外基质+过氧化氢组次之,聚苯乙烯+过氧化氢组最低,各组间差异有显著性意义();④结果表明,细胞外基质可以提高脐带干细胞的增殖能力、抗氧化能力和成骨分化潜能,是一种有广泛应用前景的细胞体外扩增培养方法。
ORCID:-2902(赵一朗)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程
关键词:细胞外基质,脐带间充质干细胞,活性氧,抗氧化酶,细胞增殖,成骨分化